馬鈴薯葡萄糖瓊脂(PDA)的應(yīng)用！
一、概述
馬鈴薯葡萄糖瓊脂是食用菌母種*常用培養(yǎng)基之一，可用于霉菌，酵母菌計(jì)數(shù)。配方如下：馬鈴薯200g制成浸出液，葡萄糖20g，瓊脂15〜20g，水1000mL，不調(diào)節(jié)pH。制備方法如下：取新鮮馬鈴薯200g，洗凈去皮切成小塊，加水煮沸20〜30min（能被玻璃棒戳破即可），然后用四層紗布過(guò)濾，再根據(jù)需要加入葡萄糖或蔗糖20g和瓊脂15〜20g，繼續(xù)加熱攪勻，稍冷卻后補(bǔ)足水分至1000mL制備PDA培養(yǎng)基有時(shí)可加入氯霉素或土霉素等抑制細(xì)菌的生長(zhǎng)，減少干擾。若不加瓊月旨，可用于真菌的液體培養(yǎng)。
二、產(chǎn)品用法
稱取本品 46.0g,加入 1000ml 蒸餾水中,115℃高壓滅菌 20分鐘,備用。滅菌好的培養(yǎng)基僅可重復(fù)加熱熔化一次。
三、微生物靈敏度試驗(yàn)
按標(biāo)簽用法制備培養(yǎng)基，接種以下質(zhì)控菌株，放置20-25℃需氧培養(yǎng)48-72小時(shí)。注：回收率計(jì)算時(shí)，用SDA 瓊脂做對(duì)照培養(yǎng)基。
四、制備
其配方為馬鈴薯200克、葡萄糖20克、瓊脂20克，水1000毫升。制作時(shí)先將馬鈴薯去皮，洗凈，發(fā)芽薯塊要挖去芽眼(因芽眼處含龍葵堿，有毒)，切成薄片，加水煮沸直至軟而不爛，用8層紗布(經(jīng)浸濕擰干)過(guò)濾取汁。然后將浸水漂洗并擰干的瓊脂加入馬鈴薯液汁中，煮至全部融化，再用紗布過(guò)濾，加水補(bǔ)足至1000毫升。*后加葡萄糖攪拌溶化后分裝試管、滅菌。本培養(yǎng)基適用于培養(yǎng)和保藏各種食用菌。
五、應(yīng)用
CN201110315661提供一種桑黃菌絲體的制備方法。步驟包括：桑黃菌種活化；馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基平板培養(yǎng)；刮取桑黃菌絲體接種于馬鈴薯葡萄糖液體培養(yǎng)基中進(jìn)行振蕩培養(yǎng)；收集桑黃菌絲體；提取桑黃菌絲體總RNA；瓊脂糖凝膠電泳觀察結(jié)果。本發(fā)明使用的菌種是保藏于中國(guó)典型培養(yǎng)物保藏中心(CCTCC)桑黃菌種(鮑姆層孔菌，保藏號(hào)為桑黃DL101 CCTCC M 2011137)。本發(fā)明操作簡(jiǎn)單，原理易懂，為今后獲得大規(guī)模的、高純度的桑黃菌絲體和高質(zhì)量的桑黃總RNA提供了簡(jiǎn)便快捷的方法，也為桑黃的基礎(chǔ)研究和應(yīng)用開(kāi)發(fā)奠定了基礎(chǔ)。
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